Эмбриологический протокол – это запись всех этапов работы с ооцитами, сперматозоидами и эмбрионами в процессе культивирования с 0 дня (день оплодотворения) до 5-7 дня развития (момента криоконсервации или переноса). В нем отражается метод оплодотворения, качество гамет (ооцитов, сперматозоидов) и эмбрионов.
Современные культуральные среды позволяют находиться эмбрионам всё время в лаборатории в одной среде. Это позволяет как можно реже «тревожить» эмбрионы, и большую часть времени они находятся в стабильных благоприятных условиях. Эмбриолог, как правило, оценивает развитие эмбрионов на день 1 (оплодотворение) и день 5 и 6,7. В некоторых случаях, требуется оценка на 2,3,4 день.
Оценка эмбриона проводится по определенным алгоритмам и включает в себя оценку количества клеток, их форму и качество. Эмбрионы могут развиваться по-разному: часть из них может остановиться на ранних стадиях, часть отставать в развитии.
На пятый день развития эмбрионы достигают стадии бластоцисты. У эмбриона к этому моменту формируется полость, количество клеток около 100, клетки дифференцируются на два типа. Оценка производится с использованием классификации, предложенной Дэвидом Гарднером и соавторами: с помощью цифровых и буквенных обозначений описываются размер полости, клетки внутренней клеточной массы (ВКМ), клетки трофэктодермы.
Оплодотворилось мало яйцеклеток. Почему?
Первая цифра (1-6) обозначает размер полости бластоцисты. За цифрой следует первая буква (A-C). Она обозначает качество клеток внутренней клеточной массы: А — клеток много, они плотно упакованы, С — клеток мало или нет совсем.
Последняя буква описывает качество трофэктодермы: А — клеток много, они плотно прилегают друг к другу, С — в трофэктодерме несколько вытянутых клеток.
Таким образом, эмбрион лучшего качества будет обозначаться как BL3AA, BL4AA и т.д. , хорошего качества, например, BL3BB,BL5BB, а низкого качества BL3CC, BL4BC.
Эмбрионы хорошего и отличного качества имеют больший потенциал к имплантации, однако это не значит, что у бластоцисты низкого качества совсем нет шансов. Для переноса в первую очередь всегда выбирается эмбрион лучшего качества, но, если у пациентки только одна бластоциста BL3BC, например, ее тоже можно перенести. Эмбриолог видит больше: он пользуется микроскопом и своим опытом, а цифрами и буквами не всегда можно все описать. Для криоконсервации отбирают эмбрионы только хорошего качества. Для проведения биопсии трофэктодермы — эмбрионы хорошего качества с размером полости ≥3.
В ходе стимуляции суперовуляции фолликулы созревают с разной скоростью, поэтому часть полученных ооцитов может быть незрелыми. Кроме того, некоторые ооциты могут быть абнормальными. В среднем 80-90% ооцитов «готовы» к оплодотворению. Эффективность методов оплодотворения ЭКО или ИКСИ не достигает 100%, и это чаще всего зависит от качества сперматозоидов и ооцитов.
Кроме того, качество гамет (сперматозоидов и ооцитов), как правило, оказывает влияние и на дальнейшее развитие эмбрионов. Поэтому количество полученных ооцитов на пункции фолликулов не равно количеству качественных эмбрионов к 5/6 дню развития.
ОЦЕНКА КАЧЕСТВА ЭМБРИОНОВ: классификация
Источник: embrylife.ru
Оценка эмбрионов: что означают цифры и буквы
После ЭКО или ИКСИ, если все получилось, под микроскопом можно увидеть зиготу — оплодотворенную яйцеклетку с двумя пронуклеусами (материнское и отцовское ядро). Следующим этапом «жизни» эмбриона будет стадия дробления. Сначала появятся два бластомера (клетки зиготы), затем четыре, и так далее до тех пор, пока эмбрион не будет состоять из 12–16 бластомеров.
На третий день эмбриологи проводят оценку: размера бластомеров, их симметричности, наличия или отсутствия вакуолей и фрагментации. Количество бластомеров в протоколе записывается цифрами, а качество эмбриона обозначается буквенным «индексом». Например, 4А — это «отличник» на вторые сутки развития.
На четвертые сутки, когда клеток достаточно, начинается процесс компактизации (стадия морулы). В этот момент происходит слияние бластомеров и формирование бластоцисты. Здесь эмбриолог может увидеть:
- раннюю морулу — еще видны межклеточные контакты;
- морулу — произошло полное слияние и границ между клетками нет;
- кавитирующую морулу — появляются очертания формирования полости бластоцисты.
Пятые сутки развития — финишная прямая. Эмбрион находится на стадии бластоцисты, его оболочка истончается и готовится к естественному хетчингу. Он имеет полость и дифференцировку на клетки трофэктодермы (ТЭ) и внутриклеточную массу (ВКМ). В эмбриологическом протоколе бластоцисты обозначаются цифрой и двумя буквами. Например, BL 4 AA — это бластоциста с истонченной оболочкой, отличной внутриклеточной массой и трофэктодермой.
Но в момент оценки некоторые эмбрионы могут быть еще в процессе роста, поэтому определить их качество буквенно не удается. Тогда они обозначаются как BL1 и BL2. Часто пациенты, увидев обозначение бластоцисты цифрами 2, 3 или 4, считают, что они плохого качества. Это не так — цифры говорят только о размере эмбриона, а качество всегда отмечается буквенно:
- А и В — отличное и хорошее качество;
- С — среднее качество (когда эмбриологу не нравится количество клеток, они растянуты, имеют темные включения).
При этом если оставить наблюдать эмбрионы среднего качества, есть вероятность, что на 6–7-е сутки они станут лучше.
Источник: avapeter.ru
Таблица градации эмбрионов
Для тех, кто проходит процедуру экстракорпорального оплодотворения (ЭКО), таблица градации эмбрионов объясняет классы имеющихся эмбрионов. Качество эмбрионов является основным фактором успеха процедуры ЭКО. Поскольку 60% выкидышей вызваны нарушениями в эмбрионах, использование эмбрионов самого высокого качества может привести к здоровой и безопасной истории успеха ЭКО.
Что такое градация эмбрионов?
Градация эмбрионов — это метод, используемый специалистами по ЭКО для лучшего понимания того, какие эмбрионы использовать, сколько их использовать и когда проводить перенос эмбрионов. Это позволяет определить оптимальное время, а также выбрать наиболее качественные эмбрионы. Перенос эмбрионов осуществляется на 3-й или 5-й день. Понимание разницы между этими днями может помочь принять обоснованное решение.
Оценка эмбрионов стадии кливажа на 3-й день
На 3-й день оценки эмбрионов эмбрионы называются эмбрионами стадии расщепления, поскольку эмбрион делится, а не увеличивается в размерах. Структуру эмбриона рассматривают с помощью микроскопа, чтобы проверить количество содержащихся в нем клеток, и просматривают внешний вид эмбриона.
У перспективного эмбриона должно быть от шести до 10 клеток. Внешний вид клеток считается еще одним фактором успеха. Процесс деления может играть определенную роль, поскольку эмбрион оценивается в зависимости от результата.
Например, эмбрион класса А имеет от шести до 10 клеток одинакового размера с фрагментацией менее 10%. Класс В присваивается эмбрионам с неправильной формой и фрагментацией от 25% до 50%. Эмбрионы с фрагментацией более 50% относятся к классу С.
Оценка бластоцист эмбрионов 5-го дня жизни
Эмбрионы пятого дня жизни называются бластоцистами. На этой стадии эмбрион оценивается по трем факторам: степени расширения (внутри полости), внешнему виду внутренней клеточной массы и внешнему виду трофэктодермы.
Эта система оценки более сложная, чем оценка на 3-й день. По мере деления клеток, увеличивая их количество, они начинают развиваться в два различных типа. Одна группа клеток образует внутреннюю клеточную массу (ВКМ), которая со временем формирует плод. Другие группы клеток соединяются и образуют слой клеток, которые развиваются в эпителий трофэктодермы (ТЭ). Эти типы клеток создают плаценту и другие ткани, необходимые на протяжении всей беременности.
Группы клеток двух типов работают вместе, чтобы сформировать шар для защиты плода. Заполненный жидкостью шар развивается с ICM внутри и клетками TE, образующими внешний слой. Деление всех клеток, заканчивающееся таким результатом, обеспечивает начало беременности.
Таблица оценки эмбрионов
Многие клиники по лечению бесплодия используют базовую таблицу градации для определения размеров и состояния клеток. Эмбрионы 3-го дня могут быть обозначены цифрами или буквами, в зависимости от учреждения. Клетки 1-го класса соответствуют вышеупомянутому классу А, а 4-го класса классу D.
Общая таблица оценки эмбрионов 3-го дня может быть представлена следующим образом:
Класс 1 или А: Клетки однородные, без фрагментации.
Класс 2 или B: Клетки однородны с незначительной фрагментацией
Степень 3 или C: Клетки одинакового размера с умеренной фрагментацией
Степень 4 или D: Клетки либо однородные, либо нет, с умеренной или сильной фрагментацией.
При использовании факторов оценки бластоцист на 5-й день эмбрионы располагаются по номерам, обозначающим стадии расширения клетки, и двум буквам. Первая буква обозначает ICM, а вторая класс клетки TE.
Число для расширения бластоцисты измеряется следующим образом:
Класс 1: полость бластоцели составляет менее половины объема эмбриона.
Класс 2: Полость составляет более половины объема эмбриона
Степень 3: полость заполняет эмбрион
Степень 4: Полость превышает объем эмбриона по мере истончения мембраны
Степень 5: ТЭ начинает расширяться через мембрану
Степень 6: ТЭ полностью прорывает мембрану
Первая буква, обозначающая класс МЦМ, измеряется следующим образом:
Степень A: Сплошной слой клеток
Степень B: Свободно упакованные клетки
Степень C: Немного крупных клеток
Вторая буква, обозначающая степень ТЭ, измеряется как:
Степень A: сплошной слой клеток
Степень B: Свободный слой клеток
Степень С: мало клеток
Важность оценки эмбрионов
Руководство по классификации используется в клиниках по лечению бесплодия для определения того, какие эмбрионы имеют наилучшие шансы на успешную беременность. Будучи важным фактором, градация клеток эмбриона не является единственным фактором, влияющим на эффективность лечения. Градация используется наряду с возрастом пациентов, их историей болезни и любой известной причиной бесплодия.
Показатели успеха по градации
При оценке успеха по шкале оценок выясняется, что эмбрионы, относящиеся к высшей категории, дают 65% успеха. При средней оценке вероятность беременности может составлять 50%, а при низкой менее 33%.
Градация эмбрионов не является однозначным решением проблем бесплодия. Важно помнить, что то, что может быть оценено как низкокачественная буква или цифра, как клетка эмбриона на 3-й день, может превратиться в более перспективную клетку по шкале градации на 5-й день.
На самом деле, многие исследования доказали, что при наличии двух замороженных эмбрионов, один из которых имеет более высокий класс по сравнению с другим, «лучший» не всегда оказывается самым успешным. В некоторых случаях прогнозируемый успех эмбриона с более высокой оценкой не дал полного развития, в то время как эмбрион с более низкой оценкой привел к живорождению.
Источник: planb.center