Иммуноферментный анализ
Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.
Для корректной оценки результатов ваших анализов в динамике предпочтительно делать исследования в одной и той же лаборатории, так как в разных лабораториях для выполнения одноименных анализов могут применяться разные методы исследования и единицы измерения.
Напоминаем вам, что самостоятельная интерпретация результатов недопустима, и приводимая ниже информация носит исключительно справочный характер.
Иммуноферментный анализ: показания к назначению, правила подготовки к сдаче анализа, расшифровка результатов.
Иммуноферментный анализ (ИФА, англ. Enzyme immunoassay, EIA) –лабораторный метод определения различных соединений (макромолекул, вирусов и пр.), в основе которого лежит реакция антиген-антитело.
ИФА (Иммуноферментный анализ). Просто объяснение сложного анализа.
Генетически чужеродные вещества, попадая в организм человека, вызывают специфические процессы, направленные на удаление этих веществ. Система организма, выполняющая данную функцию, называется иммунной системой, а сами процессы – иммунологическими.
Иммунная система представляет собой совокупность лимфоидных органов, которые функционируют согласованно за счет миграции лимфоцитов из крови в ткани и из ткани в кровь, медиаторов (посредников) и других факторов.
В- и Т-лимфоциты
Иммунная система слагается из центральных и периферических органов. К центральным относят тимус и костный мозг. В них лимфоциты дифференцируются (созревают) до стадии функционально активной клетки. К периферическим органам иммунной системы принадлежат лимфатические узлы, селезенка, лимфоидные структуры пищеварительного тракта, аппендикс, миндалины. В этих органах лимфоциты контактируют с антигеном, взаимодействуют между собой и с другими элементами иммунной системы.
Практически все периферические органы иммунной системы являются фильтрами или барьерами для распознавания, захвата и расщепления антигена.
Антиген (англ. antigen от antibody-generator — «производитель антител») — любое вещество, несущее признаки генетически чужеродной информации, которое организм рассматривает как чужеродное или потенциально опасное и против которого начинает вырабатывать антитела (иммунный ответ).
Способность антигенов вызывать иммунный ответ называется иммуногенностью, а способность образовывать комплексы с антителами – антигенностью.
К антигенам относятся белки, полисахариды, нуклеиновые кислоты, в том числе и в составе компонентов различных биологических структур (клеток, тканей, вирусов и т.д.).
Иммуноферментный анализ (ИФА) | Микробиология/Биохимия
Антитела (англ. antibody) – это специальные белки иммуноглобулины (Ig), которые вырабатывает иммунная система в ответ на попадание любого чужеродного агента в организм для борьбы с ним.
Антитела обладают способностью образовывать прочные комплексы с антигенами для последующего удаления их из организма.
Иммуноглобулины (Ig) по своей химической структуре относятся к гликопротеидам (белкам, содержащим в своей структуре олигосахариды). По своим свойствам и структурным особенностям иммуноглобулины подразделяются на пять основных классов: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM.
В организме антитела вырабатываются клетками крови — В-лимфоцитами. На своей поверхности эти клетки имеют рецепторы, с помощью которых они могут узнавать чужеродный антиген.
Антиген, встречаясь в кровотоке с соответствующим ему рецептором В-лимфоцита, активирует его. В-лимфоцит многократно делится и образует клон плазматических клеток. Каждый клон клеток секретирует однородные по своей структуре антитела.
Показания к проведению иммунологического обследования:
Острые и хронические бактериальные, вирусные и паразитарные инфекции (болезнь Боткина, сепсис, пневмония, лейшманиоз, туберкулез, лепра и др.), подозрение на СПИД.
Аутоиммунные заболевания (ревматическая болезнь, ревматоидный артрит, системная красная волчанка и др.).
Аллергические заболевания (бронхиальная астма, поллиноз и др.).
Злокачественные заболевания (лейкозы, лимфогрануломатоз и др.).
Кожно-венерические заболевания (контактный дерматит, пузырчатка, микоз, сифилис и др.).
Контроль цитостатической, иммунодепрессивной и иммуностимулирующей терапии.
Обследование пациентов до и после трансплантации.
Первичные иммунодефицитные состояния и др.
Постановка иммунологического диагноза складывается из следующих этапов:
- Сбор иммунологического анамнеза.
- Выявление клинических проявлений иммунопатологии.
- Иммунологические методы исследования.
В иммуноферментном анализе применяют ферменты, которые могут связывать антитела или антигены, меняют окраску специального хромогенного субстрата при взаимодействии с ним и могут быть зарегистрированы физико-химическим методом (методом спектрофотометрии, флуориметрическим, люминисцентным и др.).
На настоящий момент имеются усилительные системы, позволяющие регистрировать наличие всего нескольких сотен молекул ферментов в 1 мл раствора.
Фермент – это сложное органическое вещество, вырабатываемое живой клеткой, способствующее различным химическим реакциям, происходящим в организме.
Хромогенный субстрат – это вещество белковой природы, приобретающее определенную окраску после расщепления специфическим протеолитическим ферментом.
Фотометрический анализ — метод качественного и количественного анализа, основанный на избирательном поглощении инфракрасного, видимого или ультрафиолетового излучения молекулами определяемого компонента или его соединения с соответствующим реагентом.
При проведении иммуноферментного анализа в качестве твердой фазы используется поверхность лунок полистиролового планшета, на которую адсорбированы входящие в состав тест-системы известные антитела (против определяемого антигена).
В лунку вносят исследуемую сыворотку крови. При наличии искомого антигена он соединяется с антителом, и образуются комплексы. Лунки промывают и удаляют не связавшиеся компоненты. В лунки вносят антитела к искомому антигену, меченые ферментом. Меченые антитела присоединяются к предыдущему комплексу и также остаются на стенках.
Затем в лунки добавляют специфичный для фермента субстрат (перекись водорода) и хромоген (ортофенилендиамин). Если в исследуемой жидкости был антиген, фермент взаимодействует с перекисью водорода и разлагает его. Выделившийся при этом кислород окрашивает хромоген в желтый цвет. По интенсивности окрашивания, возникающего в результате реакции фермента и субстрата, можно судить о количестве антигенов.
По аналогичной схеме работают тест-системы для определения антител, но в качестве иммуносорбента в них используются антиген, а раствор, который добавляют, содержит раствор антигенов, меченых ферментом.
В клинической диагностике с помощью фиксированных на твердой фазе антител (антигенов), определяют присутствие антигенов микроорганизмов, антител к ДНК, иммунных комплексов, антигенов раковых клеток, антител к различным видам бактерий, вирусов, простейших.
Метод ИФА может применяться для диагностики:
- Вирусных заболеваний:
- ВИЧ-инфекции;
- вирусных гепатитов;
- цитомегаловирусной инфекции;
- вируса Эпштейн-Барр;
- герпетической инфекции;
- коронавирусной болезни.
- Для диагностики инфекций, передающихся половым путем:
- сифилиса;
- хламидиоза;
- трихомониаза;
- гонореи;
- уреаплазмоза.
- Уровня гормонов в эндокринологии.
- Аутоантител и маркеров онкологических заболеваний в онкологии.
- Общего IgE и специфических IgE антител в аллергологии.
- Лекарственных препаратов, наркотиков в биологических образцах.
- Белков сыворотки крови (ферритина, фибронектина и др.).
Подготовка к процедуре
Взятие пробы для лабораторного исследования методом ИФА должно проводиться:
- желательно с 7 до 9 часов утра;
- натощак, т.е. через 8-12 часов после последнего приема пищи;
- после воздержания от алкоголя не менее 24 часов;
- до проведения диагностических и лечебных процедур;
- в ряде случаев следует учитывать фазу менструального цикла, фармакодинамику лекарственных препаратов, циркадные ритмы.
Пациент должен находиться в спокойном состоянии не менее 15 минут: сидя или лежа. Наложение жгута (манжеты) не должно превышать 1 мин.
Преимущества иммуноферментного анализа по сравнению с другими методами определения антигенов и антител:
- высокая чувствительность (ИФА может обнаруживать одиночные молекулы анализируемого вещества);
- возможность использования минимальных объемов исследуемого материала;
- стабильность всех ингредиентов, необходимых для проведения ИФА при хранении;
- простота проведения реакции;
- возможность автоматизации всех этапов реакции;
- относительно низкая стоимость диагностических наборов.
- при наличии ревматоидного фактора в крови, который является антителом против собственных IgG;
- при различных системных заболеваниях;
- при нарушениях обменных процессов в организме;
- при приеме некоторых лекарственных препаратов;
- у новорожденных детей.
- Л. К. Решетникова. Иммунология. – Благовещенск, 2019. — 176 с.
- Гусякова О.А. Иммуноферментный анализ: учебное пособие для студентов лечебного, педиатрического, медико-профилактического факультетов, Самара: типография Клиник ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава», 2010. — 32 с.
Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.
Для корректной оценки результатов ваших анализов в динамике предпочтительно делать исследования в одной и той же лаборатории, так как в разных лабораториях для выполнения одноименных анализов могут применяться разные методы исследования и единицы измерения.
Источник: www.invitro.ru
Кто такие IFA и в чем ценность диплома
Серьезные российские вузы стремятся предоставить обширный перечень образовательных услуг, что помогает победить в конкурентной борьбе за абитуриентов. Например, ИМЭС предлагает уникальную возможность получить второй диплом IFA, дополняющий основное высшее образования и существенно расширяющий возможность для выпускника вуза.
Определение
IFA расшифровывается как Institute of Financial Accountants, или Институт финансовых аналитиков. Организация создана больше века назад – в 1916 году в Великобритании. Сегодня IFA функционирует в трех десятках самых развитых государств мира и входит в состав IFAC –Международной федерации бухгалтеров.
ИМЭС прошел сертификацию IFA в начале 2017 года. Институт стал вторым московским вузом, получившим право выдавать дипломы Института финансовых аналитиков. Обучение ведется по двум образовательным программам (экономике и менеджменту), которые также успешно прошли аккредитацию специалистов IFA.
Учебная программа
Получение диплома IFA становится подтверждением наличия у слушателя профессиональных знаний в области финансового анализа. Учебная программа включает в себя внушительный перечень дисциплин, к числу которых относятся:
- МСФО, или международные стандарты финансовой отчетности;
- основы аудита – внутреннего и внешнего;
- несколько видов менеджмента: стратегический, финансовый и т. д.;
- этика участников финансового рынка и многое другое.
Наличие диплома ИФА заметно расширяет возможность для трудоустройства, причем как в России, так и за границей. Владелец документа официально регистрируется в IFA с возможностью получения в будущем статуса ассоциированного члена.
Преимущества диплома IFA
Получение второго диплома предоставляет его владельцу несколько весомых преимуществ. Главное из них – это более высокая вероятность найти престижную и хорошо оплачиваемую работу. Другими существенными преимуществами становятся:
- повышение конкурентоспособности специалиста на профессиональном рынке труда;
- подтверждение международной квалификации;
- оформление и предоставление финансовой отчетности, составленной по МСФО, причем с правом подписи;
- расширение возможных сфер профессиональной деятельности, включая проведение аудита, комплексного финансового анализа и другие подобные работы;
- отсутствие необходимости подтверждать российский диплом при трудоустройстве за границей;
- перспективы стать ассоциированным членом IFA при прохождении следующих ступеней подготовки.
Не стоит забывать, что подтверждение квалификации по международному стандарту наглядно показывает высокий уровень подготовки выпускника вуза. Причем это в равной степени касается обоих дипломов – и основного, и IFA. Право выдавать подобные документы имеют всего несколько российских вузов. Поэтому есть смысл подробнее остановиться на преимуществах обучения именно в Институте международных экономических связей.
Плюсы получения диплома IFA в ИМЭС
ИМЭС имеет аккредитацию в экономической сфере, российскую образовательную лицензию и сертификаты нескольких международных программ, включая IFA. Институт успешно работает на рынке с 1995 года. В качестве главных достоинств обучения в ИМЭС необходимо выделить такие:
- разумная стоимость высшего образования, которая дополняется гибким и прозрачным подходом к ценообразованию;
- несколько форматов обучения, включая очное, дистанционное и их различные комбинации, а в качестве бонуса – подготовка в группах выходного дня;
- относительно небольшое количество студентов, что обеспечивает индивидуальный подход к каждому;
- получение второго диплома IFA и дипломов по нескольким другим учебным программам без отрыва от подготовки по базовой специальности;
- разноплановое сотрудничество с несколькими министерствами РФ – Минпромторговли и МЭРТ, а также рядом международных экономических организаций;
- удобный и многофункциональный образовательный портал, на котором размещен большой объем самых разнообразных методических и учебных материалов, а также различных вспомогательных сервисов и онлайн-тестов;
- активное внедрение дистанционных методов обучения, что особенно актуально по двум причинам: из-за ограничительных мер по борьбе с COVID-19 и увеличения доступности высшего образования как в финансовом, так и в географическом плане;
- квалифицированный и опытный штат преподавателей, многие из которых занимались или продолжают заниматься бизнесом.
Следует отметить, что подготовка по программе IFA ведется на русском языке, но это не отменяет углубленного изучения английского языка и еще одного иностранного. Поступление в ИМЭС – это высокая вероятность трудоустройства после завершения обучения, тем более при наличии второго диплома, подтверждающего международную квалификацию выпускника.
В финале необходимо выделить несколько самых важных моментов, касающихся диплома IFA. Получение документа становится важным шагом на пути создания успешной карьеры. Второй диплом, полученный по международной образовательной программе, – это лучшая гарантия быстрого трудоустройства. Дополнительным плюсом становится обучение в ИМЭС, который входит в число ведущих российских вузов и доказал качество подготовки за 25 лет продуктивной работы на рынке высшего образования.
Источник: imes.su
Иммуноферментный анализ (ИФА): как проводится анализ? Стоимость. Расшифровка результатов
Анализы
Автор Admin На чтение 8 мин Просмотров 64 Опубликовано 07.06.2019
Высокоточные методы анализа — неотъемлемая часть современной медицины и, в частности, диагностики. Доступные в наше время методы диагностики дают возможность своевременно выявить не только сам факт наличия
Высокоточные методы анализа — неотъемлемая часть современной медицины и, в частности, диагностики. Доступные в наше время способы диагностики дают возможность своевременно выявить не только сам факт наличия, но и количество паразитов в организме пациента.
Сейчас, как правило, пациентам предлагается пройти всего один тест — иммуноферментный анализ.
Применение анализа крови ИФА
В каких случаях применяется данный вид анализа?
На каких факторах основан ИФА?
Данная процедура помогает выявить:
- заражение организма бактериями и вирусами;
- белковую основу;
- глистные инвазии;
- инородные тела.
Собственно, процедура ИФА складывается из двух частей:
- иммунный ответ;
- ферментативная реакция.
Суть принципа «антиген-антитело» заключается в том, что возбудитель заболевания или инородное тело, то есть антиген, поступает в организм постепенно вместе с источником заражения. Этот процесс вызывает так называемый иммунный ответ, предназначенный для защиты организма от инородных элементов.
Проявления такой защиты зависят от самого антигена и от симптомов вызванной им болезни. Данная схема и получила название «антиген-антитело».
Для большей достоверности диагностики вся процедура иммуноферментного исследования проводится только в лабораториях и медицинских центрах. С пробой крови взаимодействуют различные антигены и антитела.
С целью выявления как вида, так и количества паразитов в организме пациента применяется иммуноглобулин классов «А» и «Е», который реагирует на паразитарные инвазии.
Такая процедура должна выявить:
Что представляет собой иммунная реакция и как определяется узнаваемость антигена?
Какие бывают антитела?
Фактически, антитело:
- Это просто молекула, расположенная на поверхности иммуноцита.
- Эта молекула и используется для распознания чужеродных клеток.
Передача полученной информации об антигене происходит на клеточном уровне. Связь разрушается, если клетка иммунная, если же нет — организм запускает естественную защитную реакцию.
Современной науке известны 5 классов антител, иначе называемых иммуноглобулинами или белковыми структурами.
Для обозначения антител используются латинские буквы: A, D, E, G и M.
В результатах исследования эти обозначения выглядят так:
Процедура иммуноферментного анализа
Подготовка к анализу
Забор сыворотки крови для иммуноферментного исследования проводится только в условиях лаборатории. Берут кровь из вены, удаляют оттуда элементы, способные повлиять на процесс и точность результатов. Сдают утром на голодный желудок.
Расшифровка результатов иммуноферментного анализа
Качество и количество антител говорит о присутствии чужеродных элементов в организме пациента, в том числе болезнетворных микроорганизмов. Эти же признаки указывают на то, что в организме начался воспалительный процесс.
Пример расшифровки результатов ИФА:
Стадия заболевания | IgA | IgM | IgG |
Первичная (2 недели с момента инфицирования) | + | — | — |
Первичная (2,5-3 недели с момента инфицирования) | + | + | — |
Первичная (3-4 недели с момента инфицирования) | + | + | + |
Обострение хронической фазы (2 недели с начала обострения) | + | — | + |
Хроническая | +/- | — | + |
Прошедшая (инфекция излечена) | — | — | + |
Выздоровление | Титр снизился в 2-4 раза после успешного лечения | — | Титр снизился в 4-8 раза спустя 1-1,5 месяца после успешного лечения |
Результат отрицательный | — | — | — |
Сам по себе количественное исследование, проведённое данным способом, ещё не даёт возможность точно диагностировать болезнь, назначить курс лечения и определить дозировку препаратов.
Плюсы и минусы ИФА
Сравнение дуоденального и прямого иммуноферментного метода
В процедуре ИФА напрямую используется способность антител находить антиген, образуя связи с метками. Данный способ считают промышленным, время ожидания результата составляет не более часа.
Особая метка-субстрат проявляется после ферментации. Уровень антител соответствует доле антигенов в исследуемом биоматериале.
Существует также дуоденальный (иначе — непрямой) способ исследования на паразитарные инвазии, который широко применяется, несмотря на высокую точность ИФА.
Дуоденальный (непрямой) иммуноферментный анализ проводится в 2 этапа:
- Сначала сопоставляют помеченные антитела с искомыми антигенами;
- Применяют помеченные антитела к непомеченным, обнаруженным на предыдущей стадии.
Таким образом достигается двойной контроль антигенов и антител, увеличивающий достоверность.
При непрямом ИФА в лаборатории антиген фиксируют на поверхности лунки, он образует связи с немеченной частью антител.
Достоинства дуоденального метода:
- Двойной контроль изучаемого биоматериала, что значительно повышает точность;
- Повышенная точность и специфичность самого процесса.
Однако, данный способ занимает много времени и предполагает некоторое количество дополнительных действий. Тем не менее точность исследования настолько высока, что она оправдывает этот недостаток. По этой причине большинство врачей рекомендуют именно дуоденальный метод.
Куда обращаться, как долго ждать и сколько платить?
При наличии всего необходимого инструментария и расходных материалов можно будет получить результат уже через 2 дня после сдачи. Если в лаборатории есть услуга экспресс исследование, то обработать пробу могут всего за 3-5 часов.
Где можно сдать ИФА:
- в государственной поликлинике;
- в частных клиниках.
Расценки на иммуноферментный метод напрямую зависят от уровня цен в конкретной клинике, в среднем его цена составляет не менее 4000 рублей.
Сведения, полученные в результате этого исследования, могут стать полезным вкладом в медицинскую науку, однако, пациенту следует помнить, что, поскольку стоимость так высока, разумнее будет доверить эту процедуру надёжной проверенной временем клинике.
К сожалению, государственные медицинские учреждения не всегда бывают оборудованы по последнему слову науки. Необходимых приспособлений для качественного забора биоматериала и его обработки в районной поликлинике может и не быть.
[stextbox выборе клиники для проведения ИФА следует проверить наличие у этого заведения общепризнанных международных сертификатов.[/stextbox]
Итак, чем полезен для пациента иммуноферментный анализ крови:
- позволяет обнаружить глистную инвазию ещё на ранней стадии;
- как следствие этого, позволяет своевременно начать лечение;
- устойчивость методов даёт возможность проводить мероприятие с равной точностью у детей и у взрослых.
Иммуноферментный анализ демонстрирует не только качественный, но и количественный фактор, то есть не только указывает на сам факт наличия гельминтов в организме пациента, но и даёт возможность оценить их число.
Источник: bolezney.net
5. Иммуноферментный анализ (ифа).
ИФА появился в середине 60-х годов и первоначально был разработан как метод для индификации антигена в гистологическом препарате, а также для визуализации линий преципитации в тесте иммунодиффузии и иммуноэлектрофореза, а затем стал использоваться для количественного определения антигенов и антител в биологических жидкостях. В разработке метода принимали участие Е.Энгвалл и Р.Пэлман, а также независимо от них В. Ван Вееман и Р.Шурс.
Рис. 6 Основной принцип ИФА:
Источник: studfile.net